Sự phân biệt giữa con người và yêu quáiCông chúa Peach là người bạn đồng hành trung thành của Mario, thường xuyên bị Bowser bắt cóc và cần được cứu thoát. Bowser, nhân vật phản diện chính của loạt trò chơi, luôn là đối thủ của Mario, một kẻ xấu với sức mạnh vượt trội và tham vọng xâm chiếm vương quốc Nấm. Những nhân vật như Yoshi, Toad và Donkey Kong không chỉ đóng góp vào câu chuyện mà còn mang đến những khả năng đặc biệ